Богданова С.С., Стекольников А.А., Ладанова М.А.
РЕФЕРАТ
Одним из ключевых моментов в оценке репродуктивного потенциала кобеля является оценка качества спермы. Определение концентрации сперматозоидов - обязательное и важное составляющее в спермограмме кобеля. В настоящее время существуют различных способы определения концентрации спермы: использование автоматизированной системы CASA, программы «Зоосперм», с помощью ФЭК, камерный способ. Дешевым методом, не требующим дорогостоящего оборудования для определения концентрации, является подсчет количества сперматозоидов камерным способом с сеткой Горяева. Для определения концентрации спермы необходимо ее разбавить в определенное количество раз гипертоническим раствором натрия хлорида. Для проведения исследования проводили определение концентрации спермы, полученной от 40 кобелей с различной массой тела от карликовых до гигантских пород в возрасте от 1 года до 12 лет. Эякулят собирался методом мастурбации с разделением спермы на 3 фракции. Данная процедура может осуществляться на базе любой ветеринарной клиники, с минимальным оснащением. При использовании животных в естественной вязке или для искусственного осеменения, этот анализ является одним из ключевых при оценке семени. В результате проведенного исследования мы получили результат, что для собак массой менее 15 кг оптимальной степенью разбавления второй фракции спермы будет в 10-15 раз, для собак массой 15-25 кг в 20-30 раз, для собак более 25 кг в 40-50 раз и более.
Ключевые слова: сперма, кобели производители, искусственное осеменение собак, концентрация спермы собак.
ВВЕДЕНИЕ
В современном собаководстве селекционная работа имеет большую актуальность. Чистота пород со специальными рабочими качествами и генетическое здоровье служебных собак – важные задачи для успешного разведения. В настоящее время существует потребность создания генетического банка служебных собак в нашей стране. Из-за отсутствия системы стандартизации в ветеринарной медицине, особенно связанной с репродукцией собак, ограничиваются возможности обеспечения охраны здоровья животных, сохранения генофонда племенных животных. [1] Благодаря возможностям искусственного осеменения, заводчики теперь могут выбирать племенных собак со всего мира, чтобы улучшить генетику своих питомников. [1,4] Существует взаимосвязь между концентрацией спермы и фертильной вязкой. Концентрация спермы кобелей очень варьирует, в зависимости от размера, а также внешней стимуляции. [2,3] Подбор степени разбавления остается актуальной проблемой при оценке семени от кобеля.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследование проводилось в период с сентября 2017 по август 2019 года, на базе частной ветеринарной клиники по мелким домашним животным «Багира» г.Пушкин. Эякулят от 40 кобелей с различной массой тела и разных пород в возрасте о 1 года до 12 лет собирался методом мастурбации с разделением спермы на 3 фракции. С целью разбавления отбиралась вторая, богатая сперматозоидами фракция. На подогретом стекле велась первичная оценка по густоте, а затем осуществлялось разбавление 3% раствором натрия хлорида, для подсчета в счетной камере с сеткой Горяева. Подсчет велся в 80 малых квадратах с последующим определением концентрации по формуле С=№×Д×400/н×р×1000, где: С - концентрация спермы, млн/мл № - число подсчитанных спермиев Д - степень разбавления спермы в смесителе н - число малых квадратиков (80) р – глубина счетной камеры 400 - множитель, введенный в формулу для пересчета на 1 мм² 1000 – для выражения в млн/мл, поскольку в 1мл есть 1000 микрометров (мм ³) 80 - количество малых квадратов. После проведения подсчета определяли концентрацию спермы и необходимую степень разбавления.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Как правило, при первичной оценке по густоте, выявлялось три основных картины: расстояние между сперматозоидами были примерно равны их размерам, и такая сперма имела концентрацию от 200 до 550 млн/мл (Рис.1а), (характерно для кобелей от 1 до 15 кг), расстояние между сперматозоидами были значительно меньше их размеров, такая сперма имела густоту от 550 до 700 млн/мл (характерна для кобелей от 15 до 25 кг), наблюдались «вихревые потоки», такая сперма насчитывала концентрацию более 800млн/мл (характерна для кобелей более 25 кг) (Рис. 1б). Путем экспериментального разбавления спермы в 10,15,30,40 и 50 раз с последующей её микроскопической оценкой в камере Горяева, мы выявили оптимальную степень разбавления для собак различной массы, при которой был бы наиболее удобен подсчет, А визуализация клеток была такой, чтобы среднее количество сперматозоидов в одном «большом» квадрате было 30-40 шт. Такое количество наиболее хорошо воспринимается при микроскопии. В результате экспериментального разбавления спермы мы выявили, что для собак массой менее 15 кг оптимальной степенью разбавления второй фракции спермы для оценки её концентрации можно считать показатель в 10-15 раз. Для собак массой 15-25 кг в 20-30 раз. Для собак более 25 кг в 40-50 раз и более.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В результате проведенного нами исследования нами был сделан вывод, что выбор степени разбавления спермы у кобелей зависит от массы тела животных и сильно коррелирует, от 10 до 50 раз и существенно отличается от известных показателей разбавления семени сельскохозяйственных животных. Полученные данные упрощают работу ветеринарных репродуктологов и позволяют получит большее количество спермадоз от высокоценных племенных кобелей.
РЕФЕРАТ
Одним из ключевых моментов в оценке репродуктивного потенциала кобеля является оценка качества спермы. Определение концентрации сперматозоидов - обязательное и важное составляющее в спермограмме кобеля. В настоящее время существуют различных способы определения концентрации спермы: использование автоматизированной системы CASA, программы «Зоосперм», с помощью ФЭК, камерный способ. Дешевым методом, не требующим дорогостоящего оборудования для определения концентрации, является подсчет количества сперматозоидов камерным способом с сеткой Горяева. Для определения концентрации спермы необходимо ее разбавить в определенное количество раз гипертоническим раствором натрия хлорида. Для проведения исследования проводили определение концентрации спермы, полученной от 40 кобелей с различной массой тела от карликовых до гигантских пород в возрасте от 1 года до 12 лет. Эякулят собирался методом мастурбации с разделением спермы на 3 фракции. Данная процедура может осуществляться на базе любой ветеринарной клиники, с минимальным оснащением. При использовании животных в естественной вязке или для искусственного осеменения, этот анализ является одним из ключевых при оценке семени. В результате проведенного исследования мы получили результат, что для собак массой менее 15 кг оптимальной степенью разбавления второй фракции спермы будет в 10-15 раз, для собак массой 15-25 кг в 20-30 раз, для собак более 25 кг в 40-50 раз и более.
Ключевые слова: сперма, кобели производители, искусственное осеменение собак, концентрация спермы собак.
ВВЕДЕНИЕ
В современном собаководстве селекционная работа имеет большую актуальность. Чистота пород со специальными рабочими качествами и генетическое здоровье служебных собак – важные задачи для успешного разведения. В настоящее время существует потребность создания генетического банка служебных собак в нашей стране. Из-за отсутствия системы стандартизации в ветеринарной медицине, особенно связанной с репродукцией собак, ограничиваются возможности обеспечения охраны здоровья животных, сохранения генофонда племенных животных. [1] Благодаря возможностям искусственного осеменения, заводчики теперь могут выбирать племенных собак со всего мира, чтобы улучшить генетику своих питомников. [1,4] Существует взаимосвязь между концентрацией спермы и фертильной вязкой. Концентрация спермы кобелей очень варьирует, в зависимости от размера, а также внешней стимуляции. [2,3] Подбор степени разбавления остается актуальной проблемой при оценке семени от кобеля.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследование проводилось в период с сентября 2017 по август 2019 года, на базе частной ветеринарной клиники по мелким домашним животным «Багира» г.Пушкин. Эякулят от 40 кобелей с различной массой тела и разных пород в возрасте о 1 года до 12 лет собирался методом мастурбации с разделением спермы на 3 фракции. С целью разбавления отбиралась вторая, богатая сперматозоидами фракция. На подогретом стекле велась первичная оценка по густоте, а затем осуществлялось разбавление 3% раствором натрия хлорида, для подсчета в счетной камере с сеткой Горяева. Подсчет велся в 80 малых квадратах с последующим определением концентрации по формуле С=№×Д×400/н×р×1000, где: С - концентрация спермы, млн/мл № - число подсчитанных спермиев Д - степень разбавления спермы в смесителе н - число малых квадратиков (80) р – глубина счетной камеры 400 - множитель, введенный в формулу для пересчета на 1 мм² 1000 – для выражения в млн/мл, поскольку в 1мл есть 1000 микрометров (мм ³) 80 - количество малых квадратов. После проведения подсчета определяли концентрацию спермы и необходимую степень разбавления.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Как правило, при первичной оценке по густоте, выявлялось три основных картины: расстояние между сперматозоидами были примерно равны их размерам, и такая сперма имела концентрацию от 200 до 550 млн/мл (Рис.1а), (характерно для кобелей от 1 до 15 кг), расстояние между сперматозоидами были значительно меньше их размеров, такая сперма имела густоту от 550 до 700 млн/мл (характерна для кобелей от 15 до 25 кг), наблюдались «вихревые потоки», такая сперма насчитывала концентрацию более 800млн/мл (характерна для кобелей более 25 кг) (Рис. 1б). Путем экспериментального разбавления спермы в 10,15,30,40 и 50 раз с последующей её микроскопической оценкой в камере Горяева, мы выявили оптимальную степень разбавления для собак различной массы, при которой был бы наиболее удобен подсчет, А визуализация клеток была такой, чтобы среднее количество сперматозоидов в одном «большом» квадрате было 30-40 шт. Такое количество наиболее хорошо воспринимается при микроскопии. В результате экспериментального разбавления спермы мы выявили, что для собак массой менее 15 кг оптимальной степенью разбавления второй фракции спермы для оценки её концентрации можно считать показатель в 10-15 раз. Для собак массой 15-25 кг в 20-30 раз. Для собак более 25 кг в 40-50 раз и более.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В результате проведенного нами исследования нами был сделан вывод, что выбор степени разбавления спермы у кобелей зависит от массы тела животных и сильно коррелирует, от 10 до 50 раз и существенно отличается от известных показателей разбавления семени сельскохозяйственных животных. Полученные данные упрощают работу ветеринарных репродуктологов и позволяют получит большее количество спермадоз от высокоценных племенных кобелей.
ЛИТЕРАТУРА
1. Rita Payan-Carreira1, Sónia Miranda2 and Wojciech Niżański3 1CECAV – Univ. of Trás-osMontes and Alto Douro, 2Escola Universitária Vasco da Gama, 3Univ. Environmental and Life Sciences, Wrocław, 1,2Portugal 3Poland From the Edited VolumeArtificial Insemination in Farm AnimalsEdited by Milad Manafi, Chapter · June 2011 DOI: 10.5772/20374 с.4
2. Wilson M. (1993) Non-surgical artificial insemination in bitches using frozen semen. Journal of Reproduction and Fertility 47, 307–311.
3. Tesi M1, Sabatini C2, Vannozzi I2, Di Petta G2, Panzani D2, Camillo F2, Rota A2. Variables affecting semen quality and its relation to fertility in the dog: A retrospective study. Theriogenology. 2018 Sep 15;118:34-39. doi: 10.1016/ j.theriogenology.2018.05.018. Epub 2018 May 17.
4. Дж. Симпсон, Г. Ингланд, М. Харви Руководство по репродукции и неонатологии собак и кошек 1997г. с.97
5.Федотов С.В., Архелей А.С., Сурогин М.В. Совершенствование репродукции служебных собак в условиях ЦКС МВД России // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2014. №11 (121). С. 116-120.
DETERMINATION OF THE OPTIMAL DEGREE OF DILUTION OF MALE DOG’S SPERM
S.S. Bogdanova, A.A. Stekolnikov, M. A. Ladanova
(St. Petersburg State Academy of veterinary medicine)
Key words: sperm, stud male, artificial insemination dogs, sperm concentration of dogs.
One of the key points in the assessment of the reproductive potential of males is to assess the quality of sperm. Determination of sperm concentration is a mandatory and important component in the spermogram of a male. Currently, there are various ways to determine the concentration of sperm: the use of an automated system CASA, the program "Zoosperm", with the help of FEC, chamber method. A cheap method that does not require expensive equipment to determine the concentration is counting the number of sperm in a chamber method with a Goryaev grid. To determine the concentration of sperm, it is necessary to dilute it a certain number of times with a hypertonic sodium chloride solution. For the study, the concentration of sperm obtained from 40 males with different body weight from dwarf to giant breeds at the age of 1 to 12 years was determined. Ejaculate collected by means of Masturbation with sperm separation in 3 fractions. This procedure can be carried out on the basis of any veterinary clinic, with minimal equipment. When using animals in natural mating or for artificial insemination, this analysis is one of the key in assessing the seed. As a result of the study, we obtained the result that for dogs weighing less than 15 kg, the optimal degree of dilution of the second fraction of sperm will be 10-15 times, for dogs weighing 15-25 kg 20-30 times, for dogs over 25 kg 40-50 times or more.
REFERENCES
1. Rita Payan-Carreira1, Sónia Miranda2 and Wojciech Niżański3 1CECAV - Univ. of Trás-os-Montes and Alto Douro, 2Escola Universitária Vasco da Gama, 3Univ. Environmental and Life Sciences, Wrocław, 1.2 Portugal 3 Poland From the Edited Volume Artificial Insemination in Farm Animals Edited by Milad Manafi, Chapter June 2011 DOI: 10.5772 / 20374 p.4 2. Wilson M. (1993) Non-surgical artificial insemination in bitches using frozen semen. Journal of Reproduction and Fertility 47, 307-311. 3. Tesi M1, Sabatini C2, Vannozzi I2, Di Petta G2, Panzani D2, Camillo F2, Rota A2. Variables affecting semen quality and its relation to fertility in the dog: A retrospective study. Theriogenology. 2018 Sep 15; 118: 34-39. doi: 10.1016 / j.theriogenology.2018.05.018. Epub 2018 May 17. 4. J. Simpson, G. England, M. Harvey Guide to Reproduction and Neonatology of Dogs and Cats 1997. p.97 5. Fedotov S.V., Archeley A.S., Surogin M.V. Improving the reproduction of service dogs under the conditions of the Central Control Center of the Ministry of Internal Affairs of Russia // Bulletin of the Altai State Agrarian University. 2014. No. 11 (121). S. 116-120.
1. Rita Payan-Carreira1, Sónia Miranda2 and Wojciech Niżański3 1CECAV – Univ. of Trás-osMontes and Alto Douro, 2Escola Universitária Vasco da Gama, 3Univ. Environmental and Life Sciences, Wrocław, 1,2Portugal 3Poland From the Edited VolumeArtificial Insemination in Farm AnimalsEdited by Milad Manafi, Chapter · June 2011 DOI: 10.5772/20374 с.4
2. Wilson M. (1993) Non-surgical artificial insemination in bitches using frozen semen. Journal of Reproduction and Fertility 47, 307–311.
3. Tesi M1, Sabatini C2, Vannozzi I2, Di Petta G2, Panzani D2, Camillo F2, Rota A2. Variables affecting semen quality and its relation to fertility in the dog: A retrospective study. Theriogenology. 2018 Sep 15;118:34-39. doi: 10.1016/ j.theriogenology.2018.05.018. Epub 2018 May 17.
4. Дж. Симпсон, Г. Ингланд, М. Харви Руководство по репродукции и неонатологии собак и кошек 1997г. с.97
5.Федотов С.В., Архелей А.С., Сурогин М.В. Совершенствование репродукции служебных собак в условиях ЦКС МВД России // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2014. №11 (121). С. 116-120.
DETERMINATION OF THE OPTIMAL DEGREE OF DILUTION OF MALE DOG’S SPERM
S.S. Bogdanova, A.A. Stekolnikov, M. A. Ladanova
(St. Petersburg State Academy of veterinary medicine)
Key words: sperm, stud male, artificial insemination dogs, sperm concentration of dogs.
One of the key points in the assessment of the reproductive potential of males is to assess the quality of sperm. Determination of sperm concentration is a mandatory and important component in the spermogram of a male. Currently, there are various ways to determine the concentration of sperm: the use of an automated system CASA, the program "Zoosperm", with the help of FEC, chamber method. A cheap method that does not require expensive equipment to determine the concentration is counting the number of sperm in a chamber method with a Goryaev grid. To determine the concentration of sperm, it is necessary to dilute it a certain number of times with a hypertonic sodium chloride solution. For the study, the concentration of sperm obtained from 40 males with different body weight from dwarf to giant breeds at the age of 1 to 12 years was determined. Ejaculate collected by means of Masturbation with sperm separation in 3 fractions. This procedure can be carried out on the basis of any veterinary clinic, with minimal equipment. When using animals in natural mating or for artificial insemination, this analysis is one of the key in assessing the seed. As a result of the study, we obtained the result that for dogs weighing less than 15 kg, the optimal degree of dilution of the second fraction of sperm will be 10-15 times, for dogs weighing 15-25 kg 20-30 times, for dogs over 25 kg 40-50 times or more.
REFERENCES
1. Rita Payan-Carreira1, Sónia Miranda2 and Wojciech Niżański3 1CECAV - Univ. of Trás-os-Montes and Alto Douro, 2Escola Universitária Vasco da Gama, 3Univ. Environmental and Life Sciences, Wrocław, 1.2 Portugal 3 Poland From the Edited Volume Artificial Insemination in Farm Animals Edited by Milad Manafi, Chapter June 2011 DOI: 10.5772 / 20374 p.4 2. Wilson M. (1993) Non-surgical artificial insemination in bitches using frozen semen. Journal of Reproduction and Fertility 47, 307-311. 3. Tesi M1, Sabatini C2, Vannozzi I2, Di Petta G2, Panzani D2, Camillo F2, Rota A2. Variables affecting semen quality and its relation to fertility in the dog: A retrospective study. Theriogenology. 2018 Sep 15; 118: 34-39. doi: 10.1016 / j.theriogenology.2018.05.018. Epub 2018 May 17. 4. J. Simpson, G. England, M. Harvey Guide to Reproduction and Neonatology of Dogs and Cats 1997. p.97 5. Fedotov S.V., Archeley A.S., Surogin M.V. Improving the reproduction of service dogs under the conditions of the Central Control Center of the Ministry of Internal Affairs of Russia // Bulletin of the Altai State Agrarian University. 2014. No. 11 (121). S. 116-120.